PIP2的相行為。通過將PIP2單分子膜從250Å2/分子壓縮至50Å2/分子，并觀察壓縮對界面表面壓力的影響，研究了衍生PIP2的表面壓力(π)與分子面積之間的關系。10個單獨試驗的平均等溫線如圖1a所示。正如純PIP2酰基鏈的已知組成所預期的那樣(∼50%不飽和，33%花生四烯酸)，隨著分子面積的減小，這些等溫線顯示出表面壓力平滑、單調的增加。在這些實驗中使用的任何條件下，均未觀察到PIP2單分子膜的相變。與生理條件相對應的表面壓力下PIP2的平均面積(∼30 mN/m 27)為73.1(3.0Å2/分子，略大于SAPC(65Å2)的公布值，28這是根據(jù)糖頭基的添加體積和靜電排斥預期的。盡管在生理pH下PIP2頭基的大小和相對較高的電荷密度，但該分子很容易形成緊密壓縮的單分子膜，而不是在較高的表面壓力下坍塌成水膠束結構。在所有條件下，由于屏障泄漏或單層崩塌導致的脂質損失導致的單層遲滯可以忽略不計，類似于SOPC等對照脂質(數(shù)據(jù)未顯示)。

離子強度增加對PIP2單分子膜的擴展效應。為了研究離子強度對PIP2單分子膜行為的影響，在亞相不同濃度的NaCl下取了π-A等溫線。在高于5 mN/m的所有表面壓力下，添加NaCl可顯著擴展單分子膜(圖1a)。在預先形成的PIP2單層的亞相中加入NaCl時也觀察到了這種反應。在恒定分子面積下，添加250 mM NaCl后，表面壓力增加，其大小與等溫線實驗中觀察到的大小相當，在擴散限制時間尺度上(圖1a插圖)。在π)30 mN/m時，每個PIP2分子的面積增加了13%，達到82.5Å2/分子(圖1b)。該效應的劑量反應量化表明，該效應在約200 mM NaCl下飽和，并在生理相關鹽濃度范圍內顯示出顯著變化(圖1c)。

圖1：。NaCl對PIP2單分子膜的擴張效應。(A)π-含0 mM(9)和250 mM NaCl(2)的等溫線;(插圖)亞相注入250 mM NaCl(時間)0時，恒定面積/分子的表面壓力變化。(B)在pH 1.8(n)7)和pH 7.4(n)5)條件下，30 mN/m的每個分子的面積。(C)對亞相NaCl的劑量反應。誤差條為平均值(n處為SE)5.除非另有說明。所有數(shù)據(jù)均為HEPES緩沖亞相的L-R PIP2.pH 7.4(除非另有說明)，30°C。

為了測試靜電機制(如反離子云排斥)導致單層膨脹的可能性，使用與PIP2實驗相同的條件，測量了250 mM NaCl對另一種帶電脂質L-R PS的影響。PS的單分子膜與PIP2的單分子膜沒有受到相同的影響，相反，隨著亞相離子強度的增加，PS的單分子膜表現(xiàn)出非常輕微的收縮(圖2a)。

圖2：。鹽膨脹效應對PIP2的特異性。(A)L-R PIP2和L-R PS的每分子面積;和(B)HEPES緩沖亞相上的L-R PIP2、L-R PI(4)P和L-R PI，pH 7.4.π)30mN/m下的30°C。平均值(SE，n)4.